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免疫细胞分型常见标志物—NK细胞分型标志物

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免疫细胞分型常见标志物—NK细胞分型标志物

1607 人阅读发布时间：2021-10-26 11:22

新闻图片1

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自然杀伤细胞(Natural killer，NK) 是细胞毒性淋巴细胞的一种类型，是天然免疫系统的主要组成部分。NK细胞在肿瘤和病毒感染细胞的宿主排斥反应中起重要作用。它们之所以被命名为“Natural killer”，是因为最初认为它们不需要激活就能杀死“缺失自我识别”的细胞（“缺失自我识别”是用来描述MHC-I类细胞表面标记表达水平较低的细胞，这种情况可能是由病毒感染引起的，或者是在杀伤T细胞的强选择压力下发生的）。

NK细胞与ILC1s（1型天然淋巴细胞）具有许多相似特征，包括转录因子T-bet的表达、活化诱导的IFNγ和TNFα的产生，但NK细胞还表达转录因子Eomes以及granzyme B和performin，而ILC1s不表达。因此，NK细胞更被认为是CD8⁺T细胞在天然免疫系统里的对应细胞。

NK细胞的功能由多种细胞表面受体控制，这些受体要么具有激活的细胞毒性功能，要么具有免疫调节作用¹，这些受体分类见下表1a和1b。NK细胞的细胞毒性受激活和抑制信号相互作用的调节，抑制性受体通过识别自身MHC-I类分子来阻止NK细胞的激活。

图1a：人NK表面受体的分类

新闻图片3

图1b：小鼠NK表面受体的分类

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人NK细胞常用的分型标志物

CD56

CD56，又被称作神经细胞相关粘附分子(NCAM)，在人NK细胞上的表达强度被视为一种功能指标。在血液中，我们至少鉴定出NK细胞的两个主要群体²：CD56^Dim（CD56表达水平较低）和 CD56^bright（CD56表达水平较高）。一般认为，CD56^Dim NK细胞(占NK细胞总数90%)是细胞毒性的，CD56^bright的NK细胞(占NK细胞总数10%)是抑制性的 (产生细胞因子)²。

CD16

另一个典型的NK细胞标志CD16³，又称作FCγRIII，是一种激活受体，它能产生ADCC现象（抗体依赖的细胞毒性）⁴。CD16表达增强NK细胞对抗体调理细胞的识别能力并直接杀死这些细胞⁵。

在人类中，NK细胞通常被定义为CD3^-CD56⁺细胞（也有一部分人用CD7^-CD127^-NKp46⁺T-bet⁺ Eomes⁺来定义）。如前面所述，人NK细胞的两种不同亚型分别为CD3^-CD56^DimCD16⁺或CD3^-CD56^brightCD16^-。CD3^-CD56^DimCD16⁺亚群主要存在于血液中，具有很强的细胞毒性，而CD3^-CD56^brigh^tCD16^-亚群是淋巴结中的主要亚型，仅具有较弱的细胞毒性。

人NK细胞分化或功能标志物

已有研究表明，CD3^-CD56^brightCD16^-亚群是成熟CD3^-CD56^DimCD16⁺细胞的前体细胞⁶。NK细胞成熟的后期与CD 57的表达有关。该分子在CD56^DimNK细胞上表达，并被认为是以KIR⁺、LIR-1⁺和CD94/NKG2A⁻表型^7,8为主要特征的终末分化NK细胞亚群。

在HLA-I特异性受体的表达上，这两种NK细胞亚群存在差异。CD56^brightNK细胞只表达CD94/NKG2A，而CD56^DimNK细胞也表达KIR和/或LIR-1^9,10。

此外，CD56^Dim NK细胞亚群在自然细胞毒性受体(NCRs：NKp46、NKp30和NKp44)的表达水平上往往是异质性的，这一事实导致了CD56^Dim NK细胞又可以再被细分¹¹，即NCR^dull和NCR^bright。NCR表面密度与NK介导的自然细胞毒性大小相关，在健康人群中大多数CD56^Dim KIR⁺ NKG2A⁻CD57⁺ NK细胞的NCRs表达水平较低^7,8。另一方面，CD56^brightNK细胞的NKp46表达水平明显高于CD56^Dim NK细胞。

在正常人中，除了CD56^bright和CD56^Dim NK细胞亚群外，还检测到低比例的CD56^neg CD16^brightNK细胞存在。在慢性病毒感染患者中，CD56^neg NK细胞亚群扩大，各种NK细胞亚群发生病理再分布。事实上，CD56^neg NK细胞的百分比在几种病理条件下都有增加，包括丙型肝炎病毒(HCV)^12,13、人巨细胞病毒¹⁴(HCMV)、汉坦病毒感染¹⁵和自身免疫性疾病^16-18。

最后，尽管NK细胞一直被认为是先天免疫系统的成员，但新的越来越多的证据表明，NK细胞可以表现出一些通常归因于适应性免疫细胞的特征，如亚群的扩张和收缩、寿命的延长以及对同一抗原(类似记忆的特性)的第二次识别时出现更有力的反应¹⁹。

小鼠NK细胞常用的分型标志物

在小鼠中，NK细胞被定义为CD3^-NK1.1⁺或CD3^-NKp 46⁺细胞，它们通常也表达CD49b、CD11b、CD27、T-bet和Eomes，但CD127/IL-7Rα缺乏表达。根据CD11b和CD 27的差异表达，小鼠NK细胞被分为四个顺序发育阶段²⁰：CD11b^D^imCD27^Dim、CD11b^D^imCD27^bright、CD11b^brightCD27^bright、CD11b^brightCD27^D^im。这些NK细胞亚群在组织分布上差异很大：CD11b^D^imCD27^brightNK细胞主要分布于骨髓和淋巴结，而CD11b^brightCD27^D^imNK细胞在血液、脾脏、肺和肝脏中较多，而CD11b^brightCD27^brightNK细胞分布更为均匀（如下图2所示）²¹。

图2：小鼠NK细胞的四个亚群

新闻图片5

Bioss具有丰富的NK细胞常见分型标志物相关产品，代表产品如下：

英文名称	产品编号	应用	PubMed
B3GAT1	bs-1635R	WB, ELISA, IHC, FC, IF	2
CD11b	bs-1014R	WB, ELISA, IHC, FC, IF	26
CD11b	bs-11127R	ELISA	-
CD16	bs-6028R	WB, ELISA, IHC, FC, IF	5
CD16	bsm-33096M	WB, ELISA	-
CD27	bs-23615R	WB, ELISA	-
	bs-2491R	WB, ELISA	1
	bsm-54318R	WB, IHC, ICC	-
CD56	bs-0736R	WB, ELISA, IHC, IF	2
	bs-0805R	WB, ELISA, IHC, FC, IF, ICC	2
	bsm-51499M	WB	-
CD94	bs-2521R	WB, ELISA	-
Integrin alpha 2	bs-10132R	WB, ELISA, ICC	1
	bs-2635R	WB, FC	-
	bsm-52613R	WB, IHC, IF, ICC	-
NCR1	bs-10027R	WB, ELISA	3
	bs-21362R	WB, ELISA	-
	bs-23550R	WB, ELISA, IHC, FC, IF, ICC	-
	bs-41214R	WB	-

*产品信息以官网为准：www.bioss.com.cn

参考文献：

1.Mandal A and Viswanathan C (2014) Hematology/Oncology and Stem Cell Therapy. 8, 47-55

2.Caligiuri MA, Blood, (2008)112:461-469

3.Hanna J et al, Trends Immunol, (2007) 28:201-206

4.Perussia B, Curr Top Microbiol Immunol, (1998) 63-88

5.Marquez ME et al, Cellular Immunology, (2010) 264:86-92

6.Béziat V, et.al, J Immunol. (2011) 186(12):6753-61

7.Bjorkstrom NK, et.al, Blood (2010) 116(19):3853–64

8.Lopez-Verges S, et.al, Blood (2010) 116(19):3865–74

9.Vitale M,et.al, Int Immunol (1999) 11(1):29–35

10Marcenaro E, et.al, Immunotherapy (2011) 3(9):1075–86

11.Sivori S, et.al, Eur J Immunol (1999) 29(5):1656–66

12.Gonzalez VD, et.al, Clin Immunol (2008) 128(1):46–56

13.Gonzalez VD, et.al, J Immunol (2009) 183(10):6612–8

14.Della Chiesa M, et.al, Blood (2012) 119(2):399–410

15.Bjorkstrom NK, et.al, J Exp Med (2011) 208(1):13–21

16.Nguyen S, et.al, J Neuroimmunol (2006) 179(1–2):117–25

17.Lugli E, Marcenaro E, Mavilio D.Front Immunol (2014) 5:390

18.Bjorkstrom NK, Ljunggren HG, Sandberg JK.Trends Immunol (2010) 31(11):401–6

19.Della Chiesa M, et.al, Front Immunol (2015) 6:573

20.Chiossone L, et.al, Blood. (2009)113(22):5488-96

21.Hayakawa Y, Smyth MJ.J Immunol. (2006) 176(3):1517-24

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