免疫细胞分型常见标志物—B 细胞分型标志物

B 细胞也是一异质性群体，显示不同的功能和表面标志。CD5 表达与否，将 B 细胞分为 B1 和 B2 两个亚群。B1 细胞为 CD5⁺ B 细胞，主要识别非蛋白质抗原，属于固有类淋巴细胞，B2 即通常指的 B 细胞，为 CD5^- B 细胞，主要识别蛋白质抗原。在 Th 细胞的辅助下，B2 细胞才能被完全激活并介导对 T 细胞依赖抗原的免疫应答，产生特异性抗体。B2 细胞介导的免疫应答特点为：可发生体细胞突变，有亲和力成熟，产生高亲和力抗体，可产生免疫记忆细胞 ¹。

1. 产生抗体介导体液免疫应答

◆中和作用：针对病毒、胞内寄生菌、细菌外毒素。

◆调理作用：针对胞外复制的细菌。

◆参与补体的溶细胞或溶菌作用。

◆抗体依赖细胞介导的细胞毒性作用（ADCC）：针对病毒感染细胞、肿瘤细胞。

2. 提呈可溶性抗原

B 细胞是一类抗原提呈细胞，活化后其表面 BCR 结合可溶性抗原，通过内吞和加工后，以抗原肽-MHC Ⅱ 类分子复合物形式提呈给 CD4⁺ T 细胞。

3. 参与免疫调节

激活的 B 细胞产生大量细胞因子、参与免疫调节、炎症反应及造血。

哺乳类动物 B 细胞的分化和成熟主要分为祖 B 细胞、前 B 细胞、不成熟 B 细胞、B 细胞的成熟（过渡 B 细胞到成熟 B 细胞）、活化 B 细胞和浆细胞几个阶段 ²。其中祖 B 细胞、前 B 细胞和不成熟 B 细胞的分化是抗原非依赖的，其分化过程在骨髓中进行。抗原依赖阶段是指成熟 B 细胞在抗原刺激后活化，并继续分化为合成和分泌抗体的浆细胞，这个阶段的分化主要是在外周免疫器官中进行的。

 祖 B 细胞 (pro-B cell)

 前 B 细胞 (pre-B cell)

 不成熟 B 细胞 (immature B cell)

此阶段发生轻链基因重排，故可组成完整的 IgM 分子，并表达于膜表面(IgM)，可称为 Bμ 细胞。此种细胞如与抗原结合，易使膜受体交联，产生负信号，使 B 细胞处于受抑状态，不能继续分化为成熟 B 细胞。这种作用可能是使自身反应 B 细胞克隆发生流产，是形成 B 细胞自身耐受的机制之一。不成熟 B 细胞开始丧失 Tdt 和 CD10，但可表达 CD22、CD21 及 FcR。同时 CD19、CD20 以及MHCⅡ 类分子表达量增加。

图 1：早期 B 细胞的分化过程及主要标志

CLPs, common lymphoid progenitors; BM, bone marrow; RAG, recombinase activating genes; TdT, terminal deoxynucleotidyl transferase; SLC, surrogate light chain; BCR, B cell receptor

 B 细胞的成熟

未成熟的 B 细胞将在几天内离开骨髓，并进入循环系统作为过渡 B 细胞(transitional B cells)。根据细胞表面标记的表达和功能，将过渡 B 细胞细分为 3 组：T1、T2 和 T3 B 细胞 ³。这些细胞可以在血液和次级淋巴器官中发现，但很少进入淋巴管。这些过渡细胞代表分化为更成熟的前免疫 B 细胞群之前的最后阶段，分别为滤泡(follic-lar, FO) B 细胞、边缘区(marginal zone, MZ) B 细胞、生发中心(germinal center, GC) B 细胞和记忆性(memory) B 细胞。过渡 B 细胞转变为成熟 B 细胞亚群的机制没有完全研究清楚，细胞因子的可用性、BCR 特异性和与预先存在的成熟 B 细胞的竞争都发挥了作用 ⁴。

过渡 B 细胞成熟主要发生在脾脏中，T1 B 细胞通过 BAFF 家族的配体和受体介导的信号刺激，而成熟为 T2 B 细胞。T1 B 细胞存在于脾髓和毛囊外的外周动脉淋巴管套(PALS), T2 B 细胞存在于滤泡 ⁵。在脾脏中也发生基于抗原的过渡 B 细胞的选择，以确保那些对自身抗原具有低亲合力的成熟 B 细胞的存活，以及清除那些对自身抗原具有高亲和力的成熟 B 细胞。然后，T2 B 细胞分化成能够进入生发中心的循环 B 细胞或填充于边缘区的非循环 B 细胞。生发中心中的 B 细胞成熟与抗体 V 区基因的体细胞超突变相关，这提供了产生对抗原具有高亲和力的抗体的基础 ²。离开生发中心的抗原选择的 B 细胞变为记忆性 B 细胞或浆母细胞(plasmablasts)。

表 2 人和小鼠的外周 B 细胞亚群的表面标记、相关转录因子和定位

TACI, transmembrane activator and cyclophilin ligand interactor; BCMA, B cell maturation antigen; BR3, B lymphocyte stimulator receptor 3; Ig, immunoglobulin. 

 活化 B 细胞 (activated B cell)

成熟 B 细胞被相应抗原或多克隆刺激剂刺激后成为活化 B 细胞，继而发生增殖和分化，在此过程中，膜结合 Ig 水平逐渐降低，而分泌型 Ig 逐渐增加，并可发生免疫球蛋白基因重链类别的转换。活化 B 细胞中的一部分可分化为小淋巴细胞，停止增殖和分化，并可存活数月至数年，当再次与同一抗原接触时，很快发生活化和分化，产生抗体的潜伏期短，抗体水平高，维持时间长，这种 B 细胞称为记忆 B 细胞(memory B cell)。

 浆细胞 (plasma cell，PC)

又称抗体分泌细胞(antibody secreting cell)。成熟 B 细胞接受抗原刺激后，在抗原提呈细胞和 Th 细胞的辅助下成为活化 B 细胞，进而分化为浆细胞。当成熟 B 细胞分化为浆细胞时，B 细胞表面的部分标志消失，并出现一些新的浆细胞特有标志，如浆细胞抗原-1(PCA-1) 等分子，而 mIg, MHCⅡ 类抗原、CD19、CD20、CD21、CD22 等标记消失。并可发生 Ig 的类别转换，从产生 IgM 转换为产生 IgG 、IgA 或 IgE 的 B 细胞。